酸性磷酸酶检测试剂盒
背景[1-7]
酸性磷酸酶检测试剂盒是一种用于快速、便捷地检测细胞或组织样品的裂解或匀浆产物的上清液、血浆、血清、尿液等样品中内源性的酸性磷酸酯酶活性的试剂盒。酸性磷酸酶(Acid Phosphatase),也称酸性磷酸酯酶,是一种在溶酶体中含量较高的酸性水解酶,被认为是鉴定溶酶体亚细胞组分的标志物。酸性磷酸酶是一个蛋白家族,哺乳动物中其分子量从18kD到100kD不等。酸性磷酸酶分为两类,一类为酒石酸盐敏感型,一类为氟离子敏感型。溶酶体中的酸性磷酸酶为酒石酸盐敏感型,而红细胞和巨噬细胞中的酸性磷酸酶为氟离子敏感型。
血浆中的酸性磷酸酶活性范围在2-7.9U/L,血清中酸性磷酸酶的活性范围在2.5-11.7U/L。精液(semen)中含有高浓度的酸性磷酸酯酶,活力可以达到87-436KU/L。酸性磷酸酶能在酸性条件下脱去磷酸酯的磷酸基团.人体内存在多种酸性磷酸酶同工酶,它们在血清中的浓度可以用来作为诊断相应器官的疾病重要参数.前列腺酸性磷酸酶过高可能暗示前列腺处有肿瘤,而高pvc树脂粉报价水平的抗酒石酸酸性磷酸酶则有可能意味着骨癌的风险.因此检测相应组织细胞中酸性磷酸酶的活性具有重要的意义。
检测原理:Para-nitrophenyl phosphate(pNPP)是一种常用的磷酸酶显色底物,在酸性条件下,可在酸性磷酸酶作用下生成para-nitrophenol。para-nitrophenol(p-nitrophenol)在碱性条件下,呈黄色产物,可以在400-415nm检测吸光度。产物黄色越深,说明酸性磷酸酶检活性越高,反之则酶活性越低。据此通过比色分析就可以计算出酸性磷酸酶活性水平。
注意事项:
1.如果希望进行酶活性的绝对定量,进行酶反应时必须注意精确计时。此时推荐采用孵育30分钟等较长的时间,以减小操作过程中的时间误差。同时如果样品中酶活性较高,则可以预先适当稀释样品。
2.样品溶液中须避免出现各种酸性磷酸酶抑制剂。
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