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碱性磷酸酶(ALP)测定试剂盒(微板法)的应用

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碱性磷酸酶(ALP)测定试剂盒(微板法)的应用


背景[1-3]

碱性磷酸酶(ALP)测定试剂盒(微板法)用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清、尿液等样品中内源性的碱性磷酸酯酶活性。采用PNP比色法,其检测原理是Para-nitrophenyl phosphate(pNPP)为一种常用的磷酸酶显色底物,在酸性条件下,以AMP为磷酸酰基的受体物质,可在碱性磷酸酶的作用下生成p-nitrophenol。在碱性条件下p-nitrophenol转变成醌式结构,呈较深的黄色,产物黄色越深,说明碱性磷酸酶活性越高,反之则酶活性越低,通过酶标仪测定400~415卡博特白碳黑nm处吸光度。

利用溶液颜色的深浅变化测定物质含量的方法称比色分析法。随着测试仪器的发展,从早期的目视比色到分光光度法。分光光度法不仅可适用于可见光区,还可扩展到紫外和红外光区。物质对光的吸收是比色法和分光光度法的基础,光的吸收定律:朗伯-比尔定律则是定量测定的依据。分光光度法是借助分光光度计来测量一系列标准溶液的吸光度,绘制标准曲线,然后根据被测试液的吸光度,从标准曲线上求得被测物质的浓度或含量。分光光度法与目视比色法在原理上并不完全一样。分光光度法是比较有色溶液对某一波长光的吸收情况,目视比色法则是比较透过光的强度。

碱性磷酸酶(ALP或AKP)是广泛分布于人体肝脏、骨骼、肠、肾和胎盘等组织经肝脏向胆外排出的一种酶。这种酶能催化核酸分子脱掉5’磷酸基团,从而使DNA或RNA片段的5’....


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