背景及概述[1][2]

磷酸酯酶是水解磷酯类的酶。分布甚广，种类很多。根据作用时所需氢离子浓度值的不同，可分为碱性磷酸酯酶和酸性磷酸酯酶两类。血浆中磷酸酯酶的测定，常用于某些疾病如肝病的临床诊断乳化剂。碱性磷酸酯酶是催化从单链或双链DNA和RNA分子中除去5

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-磷酸残基，即脱磷酸作用。1977年，从细菌和小牛肠道中分离得到细菌碱性磷酸酯酶(简称BAP)和小牛肠碱性磷酸酯酶(CIP)。在基因工程中主要是应用该酶处理经限制性内切酶切割后的载体DNA，去除载体DNA两末端的5

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-磷酸残基，以防止载体DNA自我环化，从而提高其重组效率。同时，在用同位素

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P标记5

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-OH末端以制备DNA或RNA探针时，先用该酶去除5

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-磷酸基，而产生5

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-OH末端，再进行末端标记。

结构[3-5]

碱性磷酸酯酶(AP，alkaline phosphatase)是广泛存在于各种生物体内，参与细胞磷代谢和信号肽转导的一种磷酸酶，其最适pH 值在7.0 以上，能够以同样的速率催化许多种磷酸单酯的水解。磷酸盐在细胞内不能合成，当磷酸盐数量受限的时候，细胞必须通过磷酸酯酶的水解从核酸、磷酸化糖和蛋白质中得到有机体所需的磷酸盐。因而AP 的来源广泛，可来源于细菌、真菌、藻类、无脊椎动物及脊椎动物。AP 在酶联免疫标记试验(ELISA)中用作的标记酶，将碱性磷酸酯酶与显色剂或去磷酸化后能发光的底物相互作用来能揭示靶与检测酶复合物的存在。AP 作为非同位素标记被广泛应用于Southern 和Northern 印记分析和DNA 序列分析等各个方面。AP 能催化除去DNA 、RNA、三磷酸核糖....