封闭用驴血清(冻干粉)的主要应用
背景[1-3]
封闭用驴血清(冻干粉)适用于免疫组化或者免疫荧光实验中样本的封闭。可以封闭待检样本中与蛋白质非特异性结合的位点,另外还可以封闭样品中内源性的Fc片段结合位点,阻断抗体与样品中的Fc受体结合,从而降低背景,减少假阳性。在选择封闭血清时,要注意封闭用血清中不能含有目标蛋白,且与一抗来源不同,可用与二抗相同来源的封闭血清。
加封闭液是为了消除抗体与固相支持物表面孔穴的非特异结合.因为抗原很难完全包被于固相支持物(如硝酸纤维素膜,组织等)孔穴表面(即存在未被抗原包被的区域),因此,抗体或试剂与孔穴表面会产生非特异性结合,影响实验结果.为了解决这仪问题,在孔穴吸附抗原后,加入一种过量的与抗原或抗体无反应的物质(称为封闭液,多用蛋白封闭),封闭可能与抗体结合的孔穴,以提高检测方法的精确度.免疫组化,是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及相对定量的研究,称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)。
抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性,免疫组织化学正是利用了这一原环保热熔胶理。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来,以此作为抗原或半抗原,通过免疫动物后获得特异性的抗体,再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。由于抗原与抗体的复合物是无色的,因此还必须借助于组织化学的方法将抗原抗体结合的部位显示出来,以其达到对组织或细胞中的未知抗原进行定性,定位或定量的研究。
使用方法:
使用时,用....
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