一、色谱柱参数及其意义

选择色谱柱时应考虑不同色谱柱参数的影响，以下内容对色谱柱的参数进行分析。

1、色谱柱尺寸

较长的色谱柱组分保留较强，运行时间较长，柱效更高，分离度效果更好。在实际工作中应综合衡量运行时间和柱效，选择长度适宜的色谱柱。例如含量测定、溶出检测对于分离的要求较低，可选用较短的色谱柱，减少运行时间；有关物质一般选择较长的色谱柱，提高分离效果。

内径小的色谱柱灵敏度较高，峰型更窄，但是载样量较小。如果载样量满足要求，需要更高更尖锐的峰提高灵敏度，可以选择更小内径。但是如果进样量超过了柱载样量，色谱峰将极大变宽。所以应在灵敏度和载样量之间综合衡量。

粒径小的色谱柱分离度较好，色谱柱压力更大。如果5μm粒径的色谱柱分离度稍有不足，则同型号3μm色谱柱的分离度一般会提供令人满意的选择性。

如果选择较小尺寸的色谱柱，应衡量柱外死体积对柱效的影响，柱外死体积包括连接管线、进样体积、色谱柱接头与色谱柱连接处的空隙等。所以一般超高效液相使用的色谱柱不适用于常规液相仪。小规格色谱柱最好使用同一品牌的仪器，减少连橡胶增塑剂接处空隙引入的死体积。题外话：岛津、安捷伦、waters之间仪器管线接头和色谱柱不匹配，仪器和色谱柱品牌不一致必然引入较大连接空隙，应注意这方面的影响。

2、其他参数

高比表面积具有较强的保留能力、柱容量和分离度，低比表面积能更快达到平衡状态，这点在梯度淋洗中很有意义。

大孔径的填料可以延长大分子在填料中的滞留时间，达到充分分离，改善峰型。大分子样品一般应选择较大孔径色谱柱，如蛋白质、多肽类。

单齿键合色谱柱平衡更快；双齿键合稳定性较好，柱容量较大。

碳栽量大保留较强，分离效果较好。反之保留较弱，分离效果较差。

封尾（也称封端）柱能减轻碱性组分（阳离子）与硅胶表面残留硅氧负离子作用而引起的色谱峰拖尾现象；对于极性样品经封尾处理与未经封尾处理的色谱柱选择性也不同。一般碱性化合物应选择封尾处理的色谱柱。

二、常见固定相解析

1、直链烷烃（C18、C8、C6、C4、C3……）

非极性和极性较弱的化合物常选择该类固定相色谱柱。一般来说，链长越长，柱容量更大，保留时间更长，分离效果更好，柱稳....