背景[1-3]

人烟酰胺磷酸核糖基转移酶(NAMPT)ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）检测人烟酰胺磷酸核糖基转移酶(NAMPT)的体外浓度。往预先包被人烟酰胺磷酸核糖基转移酶(NAMPT)捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人烟酰胺磷酸核糖基转移酶(NAMPT)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

烟酰胺磷酸核糖转移酶（NAMPT）是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）生物合成途径的关键限速酶，也被称为内脏脂肪素（Visfatin）或前B细胞克隆增强因子（PBEF）.它通过调节机体或细胞的NAD水平以及通过其他非酶机制等途径影响代谢、炎症反应、细胞的增殖、分化和凋亡，特别是衰老等诸多过程。

实验操作：

1.标准品的稀释与加样

2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。

5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7.温育：操作....