人对氧磷酶(PON)ELISAKIT的应用
背景[1-3]
人对氧磷酶(PON)ELISA KIT应用双抗体夹心法测定标本中人对氧磷酶(PON)水平。用纯化的人对氧磷酶(PON)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入对氧磷酶1(PON1),再与HRP标记的对氧磷酶(PON)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的对氧磷酶(PON)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人对氧磷酶(PON)浓度。
对氧磷酶(paraoxonase,PON)基因家族至少有三个成员,包括PON1,PON2和PON3,它们定位在染色体7q21.3-22.1。PON1基因产物,也叫血清对氧磷酶,不仅在有机磷神经毒剂解毒中起重要作用,而且与动脉粥样硬化、冠心病及2型糖尿病等疾病发病有密切关系。血清对氧磷酶能够催化磷酸酯键水解,降解有机磷酸酯、芳香羧酸酯和氨基甲酸酯,这是PON1对有机磷化合物中毒保护作用的分子基础。
但哺乳动物中PON1对有机磷的亲和性和转化率十分有限,因此,急性有机磷中毒时,PON1是没有机会发挥保护性作用的,只有在低水平和慢性中毒时,PON1才有时间和机会发挥作用。血清对氧磷酶的动物和体内实验表明,该蛋白可能有重要的病理生理学和药理学作用。随着分子生物学技术的发展,PON1基因产物的体外表达及基因治疗将成为可能,使其在有机磷农药中毒、心血管疾病和糖尿病血管并发症等救治中发挥重要作用。
应用[4][5]
人对氧磷酶(PON)ELIS....
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