乳酸脱氢酶染色液(H型四唑盐法)
背景[1-3]
乳酸脱氢酶染色液(H型,四唑盐法)主要由四氮唑蓝孵育液、阴性对照组成。染色后酶活性部位呈蓝紫色沉淀。乳酸脱氢酶染色液(H型,四唑盐法)以乳酸为底物,在酶作用下脱氢,硝基蓝四唑(nitro BT)为受氢体,接受氢后被还原为甲噁,呈蓝紫色,用以代表H型乳酸脱氢酶(心型,即LDH1)的活性。LDH1孵育液中含有特殊的中间递氢体,使定位更准确,染色更清晰。 乳酸脱氢酶(LD或LDH)是一种糖酵解酶,主要作用是催化乳酸氧化为丙酮酸,将氢转移给NAD成为NADH。乳酸脱氢酶广泛存在于人体各组织中,最多见于心肌、骨骼肌和红细胞。乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LD/LDH)为含锌离子的金属蛋白,分子量为135~140kD,由H和M两种亚基组成,是糖无氧酵解及糖异生的重要酶系之一,可催化丙酸与L-乳酸之间的还原与氧化反应,也可催化相关的a-酮酸。LDH广泛存在于人体组织中,以肾脏含量最高,其次是心肌和骨肌。红细胞内LDH约为正常血清的100倍。乳酸脱氢酶有5种同工酶,按其组织来源来说,LD1和LD2主要来源于心肌,临床常用的α-羧基丁酸脱氢酶(α-HBD)实际上就是LD1和LD2的活性之和;LD3主要来源于肺、脾;LD4和LD5(特别是LD5)主要来源于肝和骨骼肌。乳酸脱氢酶活性增高主要见于心肌梗死、急性或慢性肝炎乙醇、肝癌(尤其是转移性肝癌),其他可见于骨骼肌疾病、血液系统疾病、肺梗死、甲状腺功能减退、肾病综合征及晚期恶性肿瘤等。
乳酸脱氢酶染色液(H型,四唑盐法)操作步骤:
1.冰冻切片,无需固定。 2.切片人LDH1孵育液中,....
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