TMB显色液(ELISAHRP显色用)
背景[1-5]
TMB是用于免疫组织化学染色程序的生色底物,以及用于酶联免疫吸附测定(ELISA)的可视化试剂。TMB是白色结晶粉末,在与乙酸乙酯的溶液中形成淡蓝绿色液体。TMB因阳光和荧光灯而退化。TMB可以作为氢供体,通过过氧化物酶如辣根过氧化物酶将过氧化氢还原成水。TMB的氧化显示3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)氧化成3,3',5,5'-四甲基联苯胺二亚胺得到的二亚胺使溶液呈现蓝色,并且可以在分光光度计上以370和650nm的波长读取该颜色变化。
通过加入酸或另一种终止试剂可以停止反应。使用硫酸使TMB变黄。可以在450nm处读取颜色。于它是光敏的,TMB应避免阳光直射。目前还不知道如果TMB是致癌和证据是矛盾的:TMB不是通过诱变Ames试验和不诱导在24单臂研究肿瘤形成的老鼠。根据该证据,它已被用作替代致癌化合物,如联苯胺和邻苯二胺。TMB已在逐步取代强致癌物联苯胺和其他致癌性的联苯胺衍生物,应用于临床化验、法医检验、刑事侦破及环境监测等领域;尤其是在临床生化检验方面,TMB作为过氧化酶的新底物,在酶免疫分析法(EIA)和酶联免疫吸附检验法(ELISA)中获得了广泛的应用。
研究应用[6][7][8]
1.用于ELISA测定中TMB显色体系的优化及其稳定性研究
通过对间接酶联免疫测定中显色体系的各影响因素的研究,确定了酶联免疫测定的最优显色体系为二甲基亚砜(DMSO)配制四甲基联苯胺(TMB)浓度为0.3 mg/mL的溶液为A液,pH5.5,0.2 mol/L磷酸氢二钠与0.1 mo....
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