BLUE-BANDIT蛋白染色液应用
背景[1-3]
BLUE-BANDIT,蛋白染色液是基于考马斯亮蓝染色法对蛋白质进行染色而设计的,与传统染色液相比,本品为新型PAGE胶染色试剂,不含甲醇,醋酸等有毒或有刺激性物质,其独特配方使得表面活性剂剥离,蛋白固定,蛋白染色,非蛋白区域着色屏蔽等功能同时进行。8-10分钟即可完成page胶上蛋白染色,无需脱色。染色分辨率与传统染色方法分辨率相当。染色的蛋白带或蛋白点可进行高效电洗脱,适用于蛋白质谱分析。实验室常使用考马斯亮蓝染色法对凝胶上分离的蛋白进行染色,它既克服了氨基黑染色灵敏度不高的限制,又比银染简便易操作。目前广泛用的考马斯亮蓝有G250和R250两种。其中考马斯亮蓝G250由于与蛋白质的结合反应十分迅速,常用于蛋白质含量的测定。考马斯亮蓝R250与蛋白质反应虽然比较缓慢,但是可以被洗脱酞菁颜料下去,所以可以用来对电泳条带染色。
染色步骤
1)剥下电泳完毕的SDS-PAGE,或native-PAGE胶,(约10×10cm,厚度小于1mm),放在比凝胶稍大的可微波炉加热的带盖塑料盒中(注意:一定要有盖以防止水汽蒸发过度);
2)加入50ml染色液,放入微波炉里先用高火(微波炉*“火”)加热1分钟,取出染胶盒放在水平摇床上,中速震荡3-5min。倒掉染色液。
3)再加入50ml新的染....
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