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alpha-淀粉酶的制备方法
背景及概述[1]
alpha-淀粉酶即α-淀粉酶，广泛存在于生物界。alpha-淀粉酶能够催化随机水解淀粉的 α‑1，4‑糖苷键，产生麦芽糖、麦芽三糖和α糊精。alpha-淀粉酶广泛应用于饴糖、啤酒、黄酒、葡萄糖、酒精、白酒、味精和医药等行业。
制备[1]
（1）载体pxmj19-aph213的制备。
载体pxmj19-aph213的构建过程如下：
以引物aph213F和aph213R从载体xk99e载体上扩增出aph213基因，所用的引物如下：
aph213F：ccggatatcagcttcacgctgccgcaagcac
aph213R：ccgaagcttaattctgtttcctgtgtgaaattg
PCR条件如下：95℃ 4min；95℃ 30s、62℃ 30s、72℃ 1min，35个循环；72℃ 7min。
上述引物的设计使得aph213基因扩增过程中，在aph213基因上游形成EcoRV切点、下游形成HindIII 切点，aph213的核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示；回收PCR产物并以EcoRV和HindIII酶切，通过T4DNA连接酶，连接到同样经过EcoRV和HindIII酶切....
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